DAT는 음성인데, 용혈은 분명하다?
DAT-negative AIHA (Direct Antiglobulin Test-negative Autoimmune Hemolytic Anemia) 에 대한 실무적 접근
안녕하세요, 병리맨 블로그입니다.
오늘은 혈액은행에서 흔히 접하는 용혈성 빈혈 환자 중에서도 판단이 어려운 케이스,
바로 DAT는 음성인데, 환자는 분명히 hemolysis 소견을 보이는 경우에 대해 다뤄보겠습니다.
이런 상황에서는 DAT-negative AIHA를 반드시 감별에 올려야 합니다.
놓치면 진단 지연과 부적절한 수혈 위험으로 이어질 수 있기 때문에, 임상병리사 입장에서도 정확한 개념과 검사 전략이 필요합니다. 보통 저희는 확실한 DAT 결과만 내놓기 때문에 임상에서 이루어지는 판단에 대해서는 잘 모를텐데요.
실무에서는 어떻게 판단하고 있는지 사례를 하나 가져왔습니다.
1. 먼저, 왜 DAT가 음성일 수 있을까?
직접항글로불린검사(DAT, Direct Coombs test)는 적혈구에 부착된 IgG 또는 C3d를 탐지하는 검사입니다.
AIHA 진단의 cornerstone이지만, 모든 자가면역성 용혈빈혈이 DAT 양성으로 나타나는 것은 아닙니다.
약 5~10%의 AIHA 환자에서 DAT가 음성으로 보고되며, 최근 문헌에 따르면 기존 DAT의 민감도 한계로 20% 이상이 놓칠 수 있다고도 합니다.
주요 원인
| 항체량이 적음 | 적혈구에 부착된 IgG가 매우 소량일 경우, 시약이 감지하지 못함 |
| 항체 친화도 낮음 | 세척 과정 중 떨어져 나가서 탐지가 불가 |
| IgG가 아닌 IgA or IgM | 대부분의 DAT 시약은 IgG만 탐지 가능 |
| 보체만 결합 | 일부 C3d 전용 시약이 아닌 경우 false-negative 가능 |
| 기술적 민감도 부족 | 시약 종류, 워싱 조건, 검사자 숙련도 차이 |
2. 진단을 위한 실무적 검사 접근
DAT 음성이라고 해서 AIHA를 배제하면 안 됩니다. 정확한 진단을 위해 다음과 같은 단계적 접근이 필요합니다.
1단계: DAT 반복 검사 (다중 시약 포함)
반드시 IgG + C3d 시약이 포함된 복합 시약 사용
단일 시약 사용 시 일부 IgG 또는 C3d만 탐지 → 위음성 가능
2단계: 고감도 방법 적용
Gel card method, solid-phase method, enzyme-enhanced DAT 등
기존 tube법보다 민감도가 높아 숨어 있는 항체 검출 가능
3단계: 비IgG 항체 탐지
IgA-DAT, IgM-DAT 적용 가능 기관에 의뢰
IgA형 AIHA는 특히 성인 여성에서 드물게 보고됨
4단계: 적혈구 Elution 검사
적혈구 표면에서 항체를 elute하여 특정 항체 동정 시도
DAT 음성일지라도 elution에서 항체 검출 가능성 있음
5단계: Flow cytometry 기반 DAT (FACS-DAT)
초고감도 검사로 낮은 항체 결합도 탐지 가능
일부 대학병원 중심으로 시행 중 (ex. 서울대병원, 분당서울대 등)
3. 수혈의학 관점
수혈이 필요한 경우는 어떻게?
DAT 음성이고, 임상적 용혈 소견이 뚜렷하면 AIHA로 간주한 수혈 전략을 따릅니다.
일반적으로는 Least incompatible RBC를 수혈하며,
교차시험에서 완전 일치하는 혈액을 찾는 것이 어려운 경우도 있습니다.
-항목 주의 사항 : 추가처방
| 혈액형 재확인 | ABO typing 오류 가능성 없음 확인 |
| Autoantibody 스크리닝 | Adsorption법 등으로 alloantibody 유무 확인 |
| 치료와 병행 | Prednisolone, Rituximab 등 면역억제 치료 반응 확인 중요 |
| 응급 상황 | DAT 음성이라도 hemolysis 지표에 따라 즉시 수혈 가능 판단 필요 |
4. 병리사 실무 팁
'DAT 음성이면 용혈이 아님'이라는 고정관념을 버리자.
환자 임상과 lab data 사이에서 ‘숨은 항체’를 의심하는 병리사의 촉이 필요함.
5. Ref.
- Salama A. Autoimmune hemolytic anemia. Blood Transfus. 2015;13(3):359–367.
- Barros MM, et al. Direct antiglobulin test-negative autoimmune hemolytic anemia. Transfus Med Rev. 2010;24(2):89–99.
- Petz LD, Garratty G. Immune Hemolytic Anemias, 2nd ed. Churchill Livingstone.
- Klein HG, Anstee DJ. Mollison’s Blood Transfusion in Clinical Medicine, 12th ed.
- Garratty G. DAT-negative autoimmune hemolytic anemia: a review. Transfusion. 2004;44(8):976–979.