"장내세균 생화학 검사 배지 종류"

 

Medium	Carbohydrate	Indicator	H2S	Carbohydrate Decomposition	Original Color	Positive Reaction	Negative Reaction
KIA TSI	Glucose 0.1% lactose 1% sucrose	Phenol red Ferric ammo.sulfate	Sodium thiosulfate	Acid/Alkaline production	Red	Yellow slant/Yellow butt (A/A)	Red slant/Yellow butt (K/A) or Red slant/No change in butt (K/K)
LIA	Glucose 0.1% lysine	Bromcresol purple ( BCP )	Sodium thiosulfate Ferric ammo.sulfate	Decarboxylation of lysine	Purple	LDC + Puple(K/K)LDC - Yellow (K/A) H2S Black	Purple
SIM	peptone	Peptonized iron	Sodium thiosulfate Ferric ammo.sulfate		yellow 반고형배지	Black (positive for H2S and indole production) I : RED M : tubid	No black color (negative for H2S and indole production)
MIO	glucose tryptone ornithne	Bromcresol purple ( BCP )			Purple	Black (positive for indole production) I : RED M : tubid O : Purple	Yellow butt (negative for ornithine decarboxylation)

 

KIA, LIA, SIM, MIO는 장내세균의 동정과 감별에 흔히 사용되는 생화학적 시험배지이다.

 

KIA는 Kligler's Iron Agar의 약자로 황화수소(H2S) 생산뿐만 아니라 포도당 및 유당 발효를 테스트

 

LIA는 Lysine Iron Agar의 약자이며 라이신 탈카르복실화 및 H2S 생산을 테스트하는 데

 

SIM은 Sulfide Indole Motility의 약자이며 H2S 생산, 인돌 생산 및 운동성을 테스트

 

MIO는 Motility-Indole-Ornithine의 약자이며 운동성, 오르니틴 탈카르복실화 및 인돌 생산을 테스트

 

 KIA, LIA, SIM, MIO와 같은 생화학적 시험 배지는 미생물학 실험실에서 장내 세균의 식별 및 감별을 위해 일반적으로 사용됩니다. 이러한 테스트는 다양한 기질을 대사하거나 색상 변화, 가스 생성 또는 기타 수단을 통해 감지할 수 있는 특정 대사 부산물을 생성하는 박테리아 종의 능력을 기반으로 합니다.

예를 들어 KIA는 펩톤, 쇠고기 추출물, 효모 추출물, 포도당, 유당 및 구연산철 암모늄을 포함하는 복합 한천 배지입니다. 박테리아 샘플을 접종하면 KIA는 유기체가 포도당과 유당을 발효할 수 있는지(배지에서 산 생성 및 노란색 변화로 입증됨), 황화수소를 생성(검은색 침전물로 입증됨)할 수 있는지 여부를 나타낼 수 있습니다. . KIA는 Escherichia coli, Salmonella spp. 및 Klebsiella spp.와 같은 많은 중요한 병원체를 포함하는 Enterobacteriaceae 계열의 구성원을 식별하는 데 특히 유용합니다.

반면에 LIA는 펩톤, 쇠고기 추출물, 효모 추출물, 포도당, 라이신 및 구연산철 암모늄을 포함하는 단순한 배지입니다. 이는 라이신 탈카르복실화(알칼리성 pH 및 매체에서 자주색 색상 변화로 이어질 수 있음) 및 H2S 생산(검은색 침전물로 이어질 수 있음)을 감지하는 데 사용됩니다. LIA로 식별할 수 있는 일부 박테리아 종에는 Salmonella spp., Proteus spp. 및 Morganella spp.가 포함됩니다.

SIM은 펩톤, 쇠고기 추출물, 효모 추출물 및 티오황산나트륨을 포함하는 보다 전문화된 배지입니다. 이는 박테리아 종의 황화수소(KIA 및 LIA에서와 같이)뿐만 아니라 인돌(트립토판 분해에서 생성되며 Kovac 시약을 추가하여 감지할 수 있음) 및 운동성을 테스트하는 데 사용됩니다. 이는 접종 지점에서 박테리아 성장이 확산되는 것으로 볼 수 있음). SIM은 Escherichia속과 Proteus속의 다양한 종을 구별하는 데 특히 유용합니다.

마지막으로 MIO는 펩톤, 쇠고기 추출물, 효모 추출물, 포도당, 오르니틴 및 브로모크레졸 퍼플을 포함하는 배지입니다. 이것은 오르니틴 탈카르복실화(알칼리성 pH 및 매체에서 자주색 색상 변화로 이어질 수 있음), 인돌 생산(SIM에서와 같이) 및 운동성(SIM에서와 같이)을 감지하는 데 사용됩니다. MIO는 Salmonella, Proteus 및 Shigella 속의 구성원을 식별하는 데 유용할 수 있습니다.


카탈라아제 테스트: 이 테스트는 과산화수소를 물과 산소로 분해하는 효소인 카탈라아제의 존재를 감지하는 데 사용됩니다. 많은 박테리아가 카탈라아제를 생성하지만 일부는 그렇지 않으며 이는 유용한 진단 도구가 될 수 있습니다. 테스트를 수행하기 위해 박테리아 콜로니에 소량의 과산화수소를 첨가하고 거품(산소 가스를 나타냄)의 생성을 관찰합니다.

산화효소 검사: 이 검사는 많은 호기성 박테리아의 전자 전달 사슬에 관여하는 효소인 시토크롬 c 산화효소의 존재를 검출하는 데 사용됩니다. 테스트를 수행하기 위해 소량의 옥시다제 시약(일반적으로 N,N,N',N'-테트라메틸-p-페닐렌디아민 및 디메틸-p-페닐렌디아민 포함)을 박테리아 콜로니에 첨가하고 파란색 또는 몇 초 이내의 보라색은 긍정적인 결과를 나타냅니다.

우레아제 검사: 이 검사는 우레아를 암모니아와 이산화탄소로 분해하는 효소인 우레아제의 존재를 감지하는 데 사용됩니다. 많은 박테리아가 우레아제를 생성하며 이는 특정 종을 식별하는 데 유용한 진단 도구가 될 수 있습니다. 테스트를 수행하기 위해 박테리아 배양액을 요소 한천 플레이트에 접종하고 몇 시간 내에 핑크색(암모니아 생성으로 인한 알칼리성 pH를 나타냄)의 발달은 양성 결과를 나타냅니다.

Voges-Proskauer(VP) 테스트: 이 테스트는 포도당 발효 중에 일부 박테리아가 생성하는 대사 부산물인 아세토인의 생성을 감지하는 데 사용됩니다. 테스트를 수행하기 위해 박테리아 배양액을 포도당과 알파-나프톨 및 수산화칼륨(KOH) 시약이 포함된 VP 배지에 접종합니다. 배양 후, KOH 및 VP 시약을 첨가했을 때 붉은색(아세토인의 존재를 나타냄)이 나타나면 양성 결과를 나타냅니다.

구연산염 테스트: 이 테스트는 구연산염을 유일한 탄소원으로 활용하는 박테리아의 능력을 결정하는 데 사용됩니다. 테스트를 수행하기 위해 박테리아 배양액을 Simmons 구연산염 한천 플레이트에 접종하고 배양 후 파란색(구연산염의 활용을 나타냄)이 나타나면 양성 결과를 나타냅니다.

 

응고효소 검사: 이 검사는 혈장을 응고시키는 일부 포도상구균 종에 의해 생성되는 효소인 응고효소의 존재를 검출하는 데 사용됩니다. 이 검사는 일반적으로 황색포도상구균(응고효소를 생성함)과 다른 황색포도상구균 종(응고효소를 생성하지 않음)을 구별하는 데 사용됩니다. 테스트를 수행하기 위해 박테리아 배양균을 토끼 혈장 튜브에 접종하고 몇 시간 내에 혈전이 발생하면 양성 결과를 나타냅니다.

Methyl Red(MR) 테스트: 이 테스트는 포도당 발효 중 혼합산 생성을 감지하는 데 사용됩니다. 테스트를 수행하기 위해 박테리아 배양액을 포도당이 포함된 MR 배지에 접종하고 며칠 동안 배양합니다. 배양 후 MR 시약을 추가하면 양성 배양에서 붉은색(혼합 산의 존재를 나타냄)이 나타납니다.

Voges-Proskauer(VP) 테스트: 이 테스트는 포도당 발효 중 아세토인 생산을 감지하는 데 사용됩니다. 테스트를 수행하기 위해 세균 배양액을 포도당이 포함된 VP 배지에 접종하고 며칠 동안 배양합니다. 배양 후 VP 시약을 추가하면 양성 배양에서 붉은색(아세토인의 존재를 나타냄)이 나타납니다.

젤라티나제 테스트: 이 테스트는 젤라틴을 가수분해하는 효소인 젤라티나제의 생성을 검출하는 데 사용됩니다. 이 테스트는 일반적으로 Proteus 및 Pseudomonas와 같은 특정 박테리아 종을 구별하는 데 사용됩니다. 테스트를 수행하기 위해 박테리아 배양액을 젤라틴 한천 플레이트에 접종하고 며칠 동안 배양합니다. 배양 후 액체 또는 액화 모양의 발달은 양성 결과를 나타냅니다.

질산염 환원 테스트: 이 테스트는 박테리아가 질산염을 아질산염 또는 기타 질소 함유 화합물로 환원시키는 능력을 감지하는 데 사용됩니다. 테스트를 수행하기 위해 세균 배양액을 질산칼륨이 함유된 질산염 배지에 접종하고 며칠 동안 배양합니다. 배양 후 질산염 시약을 추가하면 양성 배양에서 붉은색(아질산염의 존재를 나타냄)이 발생합니다.