Fluoro Enzyme Immunoassay (FEIA)

FEIA는 항원, 항체의 특성, 특정 적용 분야에 따라 다양한 형식으로 구현될 수 있습니다.

가장 일반적인 두 가지 형식은 샌드위치 분석과 경쟁 분석입니다.

Sandwich FEIA
이는 특히 단백질(항체, 사이토카인 등)과 같은 큰 분자를 검출하는 데 가장 일반적인 형식입니다. 다음과 같이 작동합니다:

포착 단계: 항체가 고체 표면에 코팅됩니다.
샘플 추가: 항원(분석물)이 포함된 샘플을 추가하고 포획 항체에 결합합니다.
검출 단계: 두 번째 효소 표지 항체가 추가되어 항원의 다른 부위에 결합하여 '샌드위치'(항체-항원-항체)를 형성합니다.
형광 검출: 검출 항체에 결합된 효소가 형광 기질과 반응하여 항원 농도에 비례하는 형광 신호를 생성합니다.
응용 프로그램: 이 형식은 알레르기 테스트(예: IgE 항체 감지), 호르몬 측정 및 바이러스 진단에 널리 사용됩니다.

Competitive FEIA
이 형식은 약물, 독소 또는 호르몬과 같이 단일 에피토프(결합 부위)만 있는 소분자 또는 분석물을 검출할 때 사용됩니다.

샘플/분석물 추가: 분석물을 포함하는 샘플은 고정된 양의 항체에 결합하기 위해 알려진 양의 표지 항원과 경쟁합니다.
형광 검출: 형광 신호는 시료 내 분석 물질의 양에 반비례합니다. 시료 내 분석 물질이 적으면 표지된 항원 결합이 많아져 형광이 높아집니다.
용도: 호르몬 분석, 약물 테스트 및 작은 환경 독소 검출에 일반적으로 사용됩니다.

---

형광단 및 검출 감도
FEIA에서 형광 신호는 특정 파장에 의해 여기되면 빛을 방출하는 분자인 형광단에 의해 생성됩니다. 면역분석에 사용되는 일반적인 형광단에는 FITC(플루오레세인 이소티오시아네이트) 및 로다민이 포함됩니다. 안정성, 밝기, 형광 검출 장비와의 호환성을 기준으로 선택됩니다.

형광단을 사용하면 다음과 같은 몇 가지 장점이 있습니다.

더 높은 감도: 형광 기반 검출은 비색법이나 화학발광 방법에 비해 매우 낮은 분석물 농도를 식별할 수 있습니다. 이로 인해 FEIA는 신체에 낮은 수준으로 존재하는 바이오마커를 탐지하는 데 적합합니다.

다중화 기능: 서로 다른 형광단을 동시에 사용할 수 있으므로 단일 샘플에서 여러 분석물질을 검출할 수 있습니다. 이는 여러 바이오마커를 한 번에 테스트할 수 있는 진단 응용 분야에서 특히 유용합니다.

낮은 배경 소음: 형광등 신호는 특별히 여기되고 감지될 수 있어 비특정 신호나 배경 소음으로 인한 간섭을 최소화합니다.

---

다른 면역측정법에 비해 FEIA의 장점

	FEIA	ELISA	CLIA
Detection Method	Fluorescence	Colorimetric	Chemiluminescence
Sensitivity	High (due to fluorescence)	Moderate	High
Signal Measurement	Fluorescence emission	Optical density	Light emission
Dynamic Range	Wide	Moderate	Wide
Automation	Highly automatable	Automatable	Highly automatable
Multiplexing	Capable of multiplexing	Limited	Capable of multiplexing
Cost	Moderate to High	Low to Moderate	High

FEIA는 식품, 환경, 약물 알레르겐을 포함한 광범위한 알레르겐에 대한 특정 IgE 항체를 검출하기 위해 알레르기 진단에 광범위하게 사용됩니다. ImmunoCAP® 시스템과 같은 플랫폼은 알레르기 패널에 FEIA를 활용합니다.

자가면역질환 검사:
FEIA는 류마티스 관절염, 전신홍반루푸스(SLE), 쇼그렌 증후군과 같은 자가면역 질환의 지표인 자가항체를 검출하는 데 유용합니다. 예를 들어, FEIA를 사용하여 항핵항체(ANA)를 검출할 수 있습니다.


FEIA의 견고성, 감도 및 유연성은 진단 및 연구에 있어 아주 유용합니다.

높은 정밀도로 광범위한 분석물질을 측정하는 능력은 임상 실험실과 같은 복잡한 테스트 환경에서 특히 중요합니다.