EDTA(Ethylenediaminetetraacetic acid)는 혈액 수집 튜브에서 항응고제로 일반적으로 사용되는 킬레이트제입니다. 칼슘 이온을 결합하여 혈액 응고를 방지합니다. EDTA는 일반적으로 암모니아 검사에 사용되고 있으며 구연산염 및 옥살산염 튜브가 이 목적에 적합하지 않은 이유를 설명할 수 있습니다.
왜 혈장과 혈청중 혈장을 사용할까? : plasma vs serum
암모니아 테스트는 일반적으로 혈청보다는 혈장을 사용하여 수행됩니다.
이는 혈장과 혈청이 혈액의 구성요소에서 암모니아 측정에 영향을 줄 수 있는 서로 다른 특성을 가지고 있기 때문입니다.
혈장은 혈액이 항응고제 튜브에 수집된 다음 액체에서 세포 성분을 분리하기 위해 원심분리될 때 남아 있는 혈액의 액체 부분입니다. 혈장에는 암모니아, 단백질, 전해질 및 기타 물질을 포함하여 혈액의 모든 가용성 성분이 포함되어 있습니다.
반면에 혈청은 혈액이 응고된 후 액체에서 응고된 성분을 분리하기 위해 원심 분리된 후 남아 있는 혈액의 액체 부분입니다. 응고 과정에서 피브리노겐은 피브린으로 전환되어 응고를 형성하고,
이 과정은 암모니아 대사 경로에 관여하는 특정 효소 및 단백질을 포함하여 혈액에서 일부 단백질 및 인자를 제거합니다.
혈청대사경로
혈액이 정체되어 응고될 때 발생하는 응고 과정에서 적혈구에 자연적으로 존재하는 효소 우레아제가 우레아를 암모늄 이온(NH4+)으로 전환할 수 있습니다. 이 전환은 혈청 샘플의 암모늄 이온 농도를 증가시킵니다.
효소 활동의 보존
암모니아 테스트는 일부 효소 반응의 측정을 포함합니다. 혈장에는 정확한 암모니아 측정에 필요한 글루타메이트 탈수소효소와 같은 암모니아 대사에 관여하는 효소가 포함되어 있습니다. 혈액 응고 후 얻은 혈청은 응고 과정에서 응고 인자 및 효소의 제거로 인해 효소 활성이 감소할 수 있습니다.
암모니아 수준의 안정화
EDTA와 같은 적절한 항응고제를 사용한 혈장 수집은 샘플의 암모니아 수준을 안정화하는 데 도움이 됩니다. 암모니아는 휘발성이 있을 수 있으며 응고 과정 중에 변화를 겪을 수 있어 잠재적으로 부정확한 결과를 초래할 수 있습니다. 플라즈마 수집은 실제 분석까지 암모니아 수준의 안정성을 유지하는 데 도움이 됩니다.
In Vivo 조건
항응고제를 사용하여 수집된 혈장은 응고를 방지하고 생리학적 조건에 더 가까운 구성을 유지하므로 혈액의 In Vivo 상태를 보다 정확하게 표현합니다. 이는 거의 모든 Tube에 해당하며 응고 및 후속 프로세스에 의해 영향을 받을 수 있는 암모니아와 같은 물질에 특히 중요합니다.
요약하면, 혈장은 효소 활성을 유지하고 암모니아 수준을 안정화하여 환자의 생체 내 조건을 반영하는 보다 정확한 결과를 제공하는 능력으로 인해 암모니아 검사에서 선호됩니다.
그렇다면 citrate와 oxalate는 왜 안돼?
구연산염 튜브: Citrate
구연산염 튜브에는 킬레이트화를 통해 칼슘 이온을 결합시키는 항응고제인 구연산나트륨이 들어 있습니다. 이 특성으로 인해 구연산염 튜브는 프로트롬빈 시간(PT) 또는 활성화된 부분 트롬보플라스틴 시간(aPTT)과 같은 응고 테스트에 이상적인 것을 모두 알고 있습니다.
Citrate 간섭
구연산염은 암모니아와 반응하거나 시료의 pH를 변경할 가능성으로 인해 암모니아 테스트를 방해할 수 있습니다. 혈액 샘플에 구연산염이 있으면 암모니아 측정과 관련된 화학 반응에 영향을 미쳐 부정확한 결과를 초래할 수 있습니다. 특정 간섭 메커니즘은 사용된 분석 방법론에 따라 다를 수 있습니다.
옥살레이트 튜브
옥살레이트 튜브에는 일반적으로 옥살산칼륨 또는 옥살산나트륨이 들어 있으며 둘 다 항응고제로 작용합니다. 이 튜브는 옥살레이트가 해당 효소의 작용을 억제하기 때문에 주로 포도당 테스트를 위한 혈액 샘플을 수집하는 데 사용됩니다. 시트레이트와 유사하게 옥살레이트는 암모니아와 반응하지 않으므로 옥살레이트 튜브를 사용하면 암모니아 테스트에 대한 정확한 결과를 얻을 수 없습니다.
옥살레이트 간섭
옥살레이트는 옥살산과 이산화탄소를 생성하는 반응을 겪을 수 있기 때문에 암모니아 테스트를 방해합니다. 이러한 반응으로 인해 테스트 결과에서 암모니아 수치가 잘못 상승할 수 있습니다. oxalate에서 oxalic acid로의 전환은 샘플 저장 또는 분석 중에 발생할 수 있으며, 이는 암모니아의 정확한 정량화에 영향을 미칩니다.
대조적으로, EDTA는 유사한 간섭 문제를 가지고 있지 않으며 암모니아 테스트에 적합한 항응고제로 간주됩니다. 효과적으로 응고를 방지하고 암모니아 측정에 큰 영향을 미치는 간섭을 생성하지 않습니다.
실제 간섭 메커니즘은 분석에 따라 다를 수 있습니다.
임상적 의미 : 고 암모니아 2000ug/dl 이상 , plasma 정상 참고치 150ug/dl 이하
- 간 기능 평가: 혈중 암모니아 수치는 특히 간 질환이나 간성 뇌병증의 경우 간 기능을 평가하는 데 사용됩니다. 간은 혈류에서 암모니아를 제거하는 데 중요한 역할을 하므로 암모니아 수치가 높아지면 간 기능이 손상되었음을 나타낼 수 있습니다.
- 간성 뇌병증: 암모니아 수치가 높아지면 간성 뇌병증이라는 상태로 이어질 수 있으며, 이는 진행성 간 질환이 있는 개인에게 발생하는 심각한 신경 장애입니다. 증가된 암모니아 수치는 중추 신경계에 영향을 미치고 착란, 의식 변화, 떨림, 심지어 혼수 상태와 같은 증상을 유발할 수 있습니다.
- 요소 순환 장애: 암모니아 수치는 신체가 암모니아를 효과적으로 분해하지 못하는 유전성 대사 장애인 요소 순환 장애를 진단하고 모니터링하는 데 사용됩니다. 이러한 상태에서 암모니아는 혈액에 축적되어 무기력, 영양 부족, 발달 지연 및 신경학적 이상과 같은 증상을 유발합니다.
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