방사면역측정법(RIA), 면역방사측정법(IRMA)

방사면역측정법(RIA)은 면역 복합체 형성에 방사성표지된 분자를 사용하는 면역측정법 기술입니다

 

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방사면역측정법(RIA)

RIA는 경쟁 구속력의 원칙을 기반으로 합니다. 알려진 양의 방사성 표지된 항원 또는 항체(추적자)가 알려지지 않은 농도의 표적 항원 또는 항체를 포함하는 샘플에 추가됩니다. 추적자는 제한된 양의 특정 항체 또는 항원에 결합하기 위해 샘플에서 표지되지 않은 표적 분자와 경쟁합니다. 특정 잠복기 후 결합되지 않은 추적자가 면역 복합체에서 분리되고 면역 복합체와 관련된 방사능이 측정됩니다.

 

-민감도 및 특이성

RIA는 매우 민감하며 종종 피코그램 또는 펨토그램 범위의 매우 낮은 농도에서 물질을 감지할 수 있습니다. 또한 특정 항체나 항원을 사용하기 때문에 높은 특이성을 나타냅니다.

 

RIA는 갑상선 호르몬, 스테로이드 호르몬 및 펩타이드 호르몬과 같은 호르몬 수치를 측정하기 위해 임상 검사실에서 일반적으로 사용됩니다. 또한 치료 약물 모니터링, 종양 표지자 검출, 생물학적 샘플의 다른 분석물 정량화에도 사용됩니다.

 

그리고 방사능을 측정하기 위해 감마 계수기 또는 신틸레이션 계수기를 포함한 특수 장비를 요구합니다. 방사성 물질의 사용으로 인해 안전을 보장하고 규제 지침을 준수하기 위해 예방 조치 및 허가가 필요합니다.

 

 

 

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면역방사측정법(IRMA)

IRMA는 대상 항원이나 항체를 포획하고 검출하기 위해 코팅된 튜브 또는 비드와 같은 고체상 지지체를 사용하는 RIA의 변형입니다. 여기에는 표적 분자를 포획하는 고체상 항체와 표적 분자의 다른 에피토프에 결합하는 방사성 표지 항체의 두 가지 항체가 사용됩니다. 고상에 형성된 면역 복합체와 관련된 방사능을 측정합니다.

 

장점: IRMA는 RIA에 비해 감도가 향상되고 비특이적 결합이 감소합니다. 고체상 포획은 면역 복합체의 더 나은 분리를 제공하여 정확도를 향상시킵니다.

 

응용: IRMA는 일반적으로 호르몬, 종양 표지자, 감염 인자 및 심장 생체 표지자를 비롯한 다양한 물질을 측정하기 위한 임상 진단에 사용됩니다.

 

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RIA: 진단검사의학에서 RIA는 경쟁 결합에 의존하는 기술입니다. 여기에는 샘플에 존재하는 비방사성 항원 또는 항체와 경쟁하는 샘플에 방사성 형태의 항원 또는 항체를 도입하는 것이 포함됩니다. 이 경쟁은 특정 고정화 항체 또는 항원의 결합 부위에서 발생합니다. 결합 또는 억제 정도에 따라 관심 대상 분석물의 농도가 결정됩니다.

IRMA: 대조적으로 일반적으로 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)로 알려진 IRMA는 샌드위치 결합 방식을 기반으로 합니다. 여기서 표적 항원은 고체상 항체에 의해 샘플에서 포획되어 항원-항체 복합체를 생성합니다. 이어서 효소 표지 항체가 동일한 항원의 별개의 에피토프에 결합하여 '샌드위치'를 형성합니다. 효소는 기질과의 반응을 촉매하여 항원의 농도와 상관관계가 있는 감지 가능한 신호를 생성합니다.

-라벨링 및 감지
RIA: RIA는 요오드-125와 같은 방사성 동위원소를 라벨로 사용합니다. 방출된 방사능은 정량화되어 경쟁적 상호 작용에서 결합 정도를 나타냅니다.
IRMA: 진단용 IRMA는 서양고추냉이 과산화효소 또는 알칼리성 포스파타제와 같은 효소 라벨에 의존합니다. 이 효소는 기질과의 발색 또는 형광 반응을 촉매합니다. 생성된 색상 또는 형광의 강도는 항원 농도에 비례하므로 정확한 정량화가 가능합니다.

-감도
RIA: 진단 실험실 설정에서 RIA는 역사적으로 쉽게 감지할 수 있는 방사능 특성으로 인해 높은 감도를 제공했습니다.
IRMA: 진단용 IRMA는 RIA에 근접한 인상적인 감도 수준을 유지하므로 다양한 진단 응용 분야에 적합합니다.

-안전성과 실용성
RIA: 민감도에도 불구하고 RIA에서 방사성 동위원소를 사용하면 안전 문제가 발생합니다. 실험실은 직원 및 환경 안전을 보장하기 위해 방사성 물질의 취급, 차폐 및 폐기에 대한 엄격한 프로토콜을 준수해야 합니다.
IRMA: 효소 라벨이 있는 진단 IRMA는 보다 안전하고 실용적인 대안을 제공합니다. 방사성 물질의 필요성을 제거하고 폐기물 처리를 단순화하여 잠재적인 위험과 규제 부담을 최소화합니다.

RIA: RIA는 역사적으로 진단 실험실에서 두각을 나타냈지만 방사능과 관련된 우려와 대체 기술의 출현으로 인해 그 사용이 줄었습니다.
IRMA: 특히 ELISA 형태의 진단용 IRMA는 다양한 진단 응용 분야에서 선호되는 선택이 되었습니다. 그것의 안전성, 적응성 및 사용자 친화성은 현대 진단 실험실 의학에서 그 명성에 기여했습니다.

진단 검사 의학에서 RIA와 IRMA 사이의 선택은 감도 요구 사항, 안전 고려 사항 및 실용성과 같은 요소에 달려 있습니다.

 

RIA의 유산이 인정되는 동안 IRMA/ELISA로의 전환은 더 안전하고 다양한 진단 방법을 추구하는 현장으로 바뀌었습니다.