콜로니 형성 단위(CFU) 계산 분석 : 미생물검사

 

콜로니 형성 단위(CFU) 계산 분석 : 미생물검사 2

콜로니 형성 단위(CFU) 분석은 샘플에서 생존 가능한 박테리아 또는 기타 미생물의 수를 추정하는 데 사용되는 일반적인 방법입니다. 식품 샘플, 물 샘플 또는 임상 샘플과 같은 샘플에 존재하는 박테리아 수를 정량화하기 위해 미생물학 및 기타 분야에서 자주 사용됩니다.

 

CFU 분석은 박테리아 샘플을 일련의 희석액으로 희석하여 농도 범위를 얻은 다음 각 희석액을 고체 성장 배지에 도금하는 것을 포함합니다. 그런 다음 박테리아가 눈에 보이는 콜로니로 성장할 수 있도록 적절한 조건에서 플레이트를 배양합니다.

 

각 콜로니는 단일 CFU 또는 눈에 보이는 클러스터를 형성하기 위해 성장하고 분할된 단일 생존 가능한 박테리아 세포를 나타냅니다. 각 플레이트의 콜로니 수를 세고, 원래 샘플의 단위 부피당 CFU 수는 희석 계수와 도금된 샘플의 부피를 기준으로 계산할 수 있습니다.

 

CFU 분석은 사용된 특정 성장 조건에서 콜로니를 형성할 수 있는 살아있는 세포만 계산하기 때문에 샘플에서 생존 가능한 박테리아의 수를 추정하는 데 유용합니다. 그러나 일부 박테리아는 사용된 특정 조건에서 성장할 수 없거나 성장 배지 또는 기타 요인에 의해 억제될 수 있으므로 CFU 수가 샘플에 존재하는 총 박테리아 수를 반영하지 않을 수 있다는 점에 유의하는 것이 중요합니다. 또한 CFU 분석은 통계적 가정을 기반으로 하며 희석 및 계산 기술의 정확도에 따라 약간의 변동성이 있을 수 있으므로 세균 집단의 추정치만 제공합니다.

 

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CFU 계산 공식

 

CFU = (플레이트의 콜로니 수 / 희석 계수) x (1 / 플레이팅된 부피)

여기서 희석 계수는 도금 전 샘플에 대해 수행된 희석의 양을 나타내며, 도금된 부피는 플레이트에 뿌려진 희석된 샘플의 양입니다.

 

예시 1

생존 가능한 세균수를 추정하려는 박테리아 배양이 있다고 가정합니다. 배양액을 10배 희석한 다음 희석된 샘플 0.1mL를 한천 플레이트에 플레이팅하고 밤새 배양합니다. 다음날 플레이트에서 150개의 콜로니가 나왔다면?

 

희석배수는 10이고 도금된 부피는 0.1mL 또는 0.0001L입니다.

 

CFU = (150 콜로니 / 10) x (1 / 0.0001 L) = 1.5 x 10^6 CFU/mL

 

따라서 mL당 약 150만 CFU였습니다.

 

예시 2

 

대장균 박테리아의 존재 여부를 테스트하려는 물 샘플이 있다고 가정합니다. 1mL 샘플을 취하여 한천 플레이트에 뿌린 다음 밤새 배양합니다. 다음날 접시에 있는 20개의 콜로니를 세었다면?

 

이 경우 도금되는 부피는 0.001L입니다.

 

CFU = (20 콜로니 / 1) x (1 / 0.001 L) = 20,000 CFU/mL

 

따라서 물 샘플은 mL당 약 20,000 CFU였습니다.