Broth Dilution test
박테리아는 토양에서 물까지, 인체에서 다른 동물에 이르기까지 거의 모든 곳에 존재하는 미생물입니다. 그들은 생태계에서 중요한 역할을 하며 일부는 항생제, 식품 및 음료와 같은 다양한 제품의 생산에 유용합니다. 그러나 일부 박테리아는 심각한 건강 문제로 이어질 수 있는 유해한 감염을 일으킬 수 있습니다. 그렇기 때문에 특히 최소 억제 농도(MIC) 및 최소 살균 농도(MBC) 측면에서 박테리아가 항생제와 상호 작용하는 방식을 이해하는 것이 필수적입니다.
MIC와 MBC는 세균 감염에 대한 항생제의 효과를 결정하는 데 사용되는 두 가지 필수 변수입니다.
MIC는 박테리아의 성장을 억제하는 항생제의 최저 농도를 말하며, MBC는 박테리아를 죽이는 항생제의 최저 농도를 나타냅니다. 즉, MIC는 박테리아의 성장을 멈추는 데 필요한 최소 항생제 양이며 MBC는 박테리아를 죽이는 데 필요한 최소 양입니다.
MIC와 MBC를 결정하기 위해 연구자들은 일반적으로 액체(Broth) 희석법이라는 기술을 사용합니다. 이 방법은 다양한 농도의 항생제가 들어 있는 일련의 시험관을 준비한 다음 각 시험관에 박테리아를 추가하는 것입니다. 그런 다음 튜브를 일정 기간 동안 배양하고 결과를 관찰합니다.
다음은 일반적으로 검사실에서 사용되는 테스트입니다.
- 균주 선택: 검사할 세균 균주는 감염 유형과 평가되는 항생제에 따라 선택됩니다. 세균 균주는 임상적 관련성이 있어야 하며 치료 중인 감염을 대표해야 합니다.
- 세균 현탁액의 준비: 세균 현탁액은 배지에서 세균을 성장시키고 세균 세포의 농도를 표준 접종 크기로 조정하여 준비합니다. 접종 크기는 테스트가 박테리아 성장의 변화를 감지할 수 있을 만큼 충분히 민감하도록 최적화되어야 합니다.
- 항생제 용액 준비: 다양한 농도의 항생제가 들어 있는 일련의 튜브를 준비합니다. 항생제 농도 범위는 일반적으로 테스트할 항생제 및 세균 균주에 대한 예상 MIC 및 MBC 값을 기준으로 선택됩니다.
- 박테리아 현탁액의 접종: 박테리아 현탁액을 항생제 용액이 들어 있는 각각의 튜브에 첨가한다. 박테리아 현탁액만 포함하고 항생제는 포함하지 않는 컨트롤 튜브도 포함되어 양성 컨트롤 역할을 합니다.
- 인큐베이션: 그런 다음 테스트 중인 박테리아 균주와 항생제에 따라 특정 온도와 특정 시간 동안 튜브를 인큐베이션합니다. 18h
- 결과: 인큐베이션 후, 튜브에서 가시적인 성장을 관찰하고, 가시적인 성장을 방지하는 항생제의 최저 농도로 MIC를 기록한다(육안관찰) MBC를 결정하기 위해 눈에 보이는 성장이 보이지 않는 튜브의 내용물을 항생제가 없는 신선한 평판배지에 접종한 후 다음 다시 배양합니다. 계대 배양 배지에서 박테리아 성장을 방지하는 항생제의 최저 농도를 MBC로 기록합니다.
- 해석: MIC 및 MBC 값은 테스트 중인 항생제 및 박테리아 균주에 대해 설정된 임상 중단점(STOP)을 기반으로 해석됩니다. 중단점은 임상적 성공 또는 실패와 관련된 항생제의 농도 범위로 정의됩니다.
- MIC: 액체배지희석법으로 알수있고
- MBC: 평판배지희석법으로 알수있다.
MIC와 MBC는 항생제 개발과 세균 감염 치료에 중요합니다. MIC가 너무 높으면 항생제가 감염 치료에 효과적이지 않을 수 있습니다. 반면에 MBC가 너무 높으면 항생제가 박테리아를 죽일 수 없어 박테리아가 계속 자라고 감염이 지속되도록 할 수 있습니다. 따라서 박테리아의 성장을 효과적으로 억제하고 죽일 수 있는 최적의 항생제 농도를 찾는 것이 필수적입니다.
MIC와 MBC는 박테리아의 종류, 항생제의 종류, 항생제의 작용 방식 등 다양한 요인에 따라 달라질 수 있습니다. 일부 박테리아는 특정 항생제에 더 내성이 있을 수 있으므로 성장을 억제하거나 죽이려면 더 높은 농도가 필요할 수 있습니다. 또한 일부 항생제는 박테리아를 죽이지 않고 박테리아 성장만 억제할 수 있는 반면 다른 항생제는 박테리아 성장을 억제하지 않고 죽일 수 있습니다.
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