혈액은행 비예기항체의 선별 및 동정 : Exclusion rule = cross out -antigram

Stem cell transplant ABO mismatch : 조혈모세포 ABO불일치

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비예기항체 선별검사는 임상적으로 중요한 항체를 정확하게 식별하기 위해 임상 혈액은행 환경에서 사용됩니다. 가능성이 희박한 특이성을 배제하기 위한 체계적인 접근 방식을 사용하고, 반응성 패턴을 분석하고, 통계적 검증을 적용함으로써 혈액 은행 임상병리사는 자신 있게 항체를 식별하고 환자에게 적절한 수혈 또는 이식 전략을 결정할 수 있습니다.

 

일단 비예기항체 선별검사를 위해서는 각각의 별도 선별혈구 ( panel cell ) 가 있어야합니다.

 

환자의 항체를 선별하려면 알고있는 항원이 있어야겠죠?

 

각각의 panel cell을 1, 2 를 지정하여 ID를 하는이유는 해석의 차이도 있지만

 

선별혈구 2~3개를 혼합하여 사용하면 오히려 항원-항체 반응이 약화되므로 권장하지 않습니다.

 

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Exclusion rule = cross out 

크로스아웃은 환자의 혈액에 존재하는 항체를 식별하는 과정에서 중요한 도구입니다. 잠재적인 항체 특이성을 체계적으로 배제할 수 있습니다. 이 기술은 관찰된 반응의 항체 목록을 좁히는 데 도움이 됩니다. 특정 항원을 보유하고 있음에도 불구하고 반응하지 않는 세포는 교차 음성세포일 수 있으며, 이는 해당 항체 특이성이 존재할 가능성이 없음을 나타냅니다.

이 프로세스는 항체식별을 간소화하고 항체 결정의 정확도를 높이는 데 유용합니다.

 

즉, 응집이 보이지 않는 혈구에 속하는 항원은 배제를 시키는 것.

 

이형접합체 또는 Dosage effect 등을 고려하여 항원이 있음에도 음성으로 보이는 경우도 있다는 사실을 잊지마세요.

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항체 선별검사 ---- Positive

 

Case	panel cell 1	panel cell 2
D	+	+
C	0	+
c	+
E	+
e		+
K	+	+
k	0	+
Fya	+	+
Fyb
Jka	+	+
Jkb	+	+
Lea		+
Leb	+	+
P1	+	+
M	+	+
N	+	+
S		+
s	+	+
응집1	+	0
응집2	0	+
응집3	+	+

 

 

위 표를 보시면 응집양상을 1,2,3으로 나눠놨습니다.

 

1번 응집양상은 선별혈구1에서 응집반응이 나왔으므로 선별혈구 1 RBC에만 있는 항원에 대한 항체를 나타냅니다.

 

2번 응집 양상은 선별혈구2에 응집반응이 나왔으므로 선별혈구 2 RBC에만 있는 항원에 대한 항체를 나타내는것이죠.

 

근데 3번 응집양상을 각 선별혈구 1, 선별혈구 2에 대해서 모두 반응이나왔습니다.

 

이건 자가항체 또는 동종항체가 존재하는 경우입니다.

 

 

항체 선별검사 판독 ---- Negaitive

1. 선별검사 음성 : 말 그대로 음성이기 때문에 비예기항체가 없다고 판단.

 

2. 선별검사 음성인데 비예기항체 존재

 

-항체 타이터가 낮은경우 (역가) ----> Avidity가 낮다.

 

-적혈구항원의 약화 ----> dosage effect

 

- 모든 인종의 저빈도항원 존재 -----> 동정혈구에 항원이 포함되지 않아서 동정이 어렵습니다. 임상적의의는 ↓

 

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항원동정표 예시를 들어보겠습니다.

 

일단 동정에서 FDA가 반드시 요구하는 항원들이 있습니다. 참고하세요

 

FDA: D,C,E,c,e,K,k, duffy, lewis, P, MNS

 

Cell	D	C	c	E	e	K	k	Fya	Fyb	Jka	Jkb	Lea	Leb	P1	M	N	S	s	Patient Results
																			4	LISS/coombs	Enzyme
1	+	+	0	+	+	0	+	0	+	0	+	0	+	+	0	0	+	0		+
2	+	+	0	0	+	+	+	+	+	+	+	0	+	0	+	0	+	0		+
3	+	0	+	+	0	0	+	0	+	0	+	+	0	0	+	0	0	√		-
4	+	0	+	0	+	0	+	0	0	+	0	0	+	+	+	0	0	√		-
5	0	+	+	0	+	0	+	0	+	0	0	+	+	0	+	+	0	1+		-
6	0	0	+	+	+	0	+	0	+	+	0	0	+	0	+	+	0	√		-
7	0	0	+	0	+	+	+	0	+	0	+	+	0	+	+	+	0	√		-
8	+	+	0	0	+	0	+	+	+	0	+	0	+	0	+	0	0	2+		-
9	0	0	√	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0		-
Auto																				-

 

이런 동정표에도 원칙과 규칙이 있습니다.

 

크로스아웃 룰 안에도 또 규칙이 있는데요.

 

1.그것을 Two or Three rule이라고 합니다. ( out rule의 세부 rule)

 

Two : 최소 항원이 음성인 2개 이상의 RBC에서 음성, 항원이 양성인 2개 이상의 RBC에서 양성반응 확인을 권장하는것 

Three : 최소 항원이 음성인 3개 이상의 RBC에서 음성, 항원이 양성인 3개 이상의 RBC에서 양성반응 확인을 권장하는것 

 

이해가 됐나요? 신뢰도 향상을 위해서 생겼습니다.

 

이런 룰을 지키면서 반응 강도를 기록 ( Dosage effect고려) : Ee,Ce,MN,Ss,Fy,Jk

 

하고 선별혈구 결과를 참조하고 반응단계 (냉장, 실온, AHG), 처리(효소,Ph)등에 따라 변화를 관찰하며 항체를 골라내는것입니다.

 

2.Cross Out rule에서 응집반응이 없는 (동형접합) 적혈구항원의 해당 항체 배제

 

아래표를보면 맨 오른쪽 결과에 LISS/Coombs에 반응이 보이고 왼쪽에 셀은 1번과 2번,5번,8번만 나와있습니다.

 

그러므로 응집반응이 없는 나머지 Cell들은 해당 항체들을 배제한다는 것이죠.

 

3.Doble population을 고려해서 RBC Phnotype을 하는 것도 중요합니다.

Cell	D	C	c	E	e	K	k	Fya	Fyb	Jka	Jkb	Lea	Leb	P1	M	N	S	s	Patient Results
																			4	LISS/coombs	Enzyme
1	+	+	0	+	+	0	+	0	+	0	+	0	+	+	0	0	+	0		+
2	+	+	0	0	+	+	0	+	0	+	+	0	0	0	+	0	+	0		+
3	+	0	+	+	0	0	+	0	+	0	+	+	0	0	+	0	0	0		-
4	+	0	+	0	+	0	+	0	0	+	0	0	+	+	+	0	0	0		-
5	0	+	+	0	0	0	+	0	+	0	0	+	+	0	+	+	0	0		+
6	0	0	+	+	+	0	+	0	+	+	0	0	+	0	+	+	0	0		-
7	0	0	+	0	+	+	+	0	+	0	+	+	0	+	+	+	0	0		-
8	+	+	0	0	0	0	+	+	+	0	+	0	+	0	+	0	0	+		+
9	0	0	√	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0		-
Auto																				-

Anti- C

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이와 같은 맥락으로 Cold와 항체를 배제시키면서 효소처리법에서 반응이 나오는 항체와 음영부분을 고려 ( 효소처리시 반응이 사라지는 경우)해서 다른 항체와 복합항체들을 찾아냅니다. 오히려 반응단계를 4'c로 변경해서 강화 시키는 경우도 있죠.

 

그리고 복합항원에 대한 항체도 있습니다.

 

anti-ce는 anti-c와 anti-e와는 달리 c와e항원이 동시에 있는 혈구하고만 반응합니다.

 

복잡하지만 알면 재미있는 케이스도 있습니다.

 

효소처리 반응시 없어지는 간단한 경우를 알려드리겠습니다.

	fyb	Patient Results
		4	LISS/coombs	Enzyme
1	+		1 +	0
2	+		1+	0
3	+		1+	0
4	+		0	0
5	+		1+	0
6	+		0	0
7	0		0	0
8	+		1+	0
9	+		1+	0
			-	0

몇개월 전에 anti- fyb가 검출되었던 환자입니다.

 

더피를 가져왔는데요 보시면 1,2,3,5,8,9번 혈구에 1+를 보이고 있습니다.

 

근데 4번 6번 혈구는 음성을 보이고있죠

 

이는 1,2,3,5,8,9 번 혈구는 동형접합체고

 

4번 6번 혈구는 이형접합체입니다.

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임상적으로 중요한 항체 (Rh-Hr 항체, anti-kidd, anti-Duffy 등) 검출 시 반드시 해당항원 음성 혈액을 찾아

 

항글로불린 교차시험에 음성임을 확인하고

 

가능하면 해당항원에 대한 혈청학적 검사를 통해 항체음성임을 확인하고 출고하는게 숙명입니다.

 

요즘은 BISS가 있죠?

 

재밌는 혈액은행

 

ID 케이스를 많이 만들어서 올리고싶은데 너무 빡세네요..

 

자주 올려보겠습니다.